Laboratorios Bagó > Bibliografías > El Polimorfismo en el Intrón 4 del Gen de la Óxido Nítrico Sintetasa Endotelial es un Marcador de Enfermedad Coronaria en Hombres Afroamericanos y Caucásicosv

Introducción

El óxido nítrico (ON) es una molécula con elevada capacidad de difusión y de corta vida media que interviene en numerosas vías metabólicas. Se produce enzimáticamente a partir de L-arginina por acción de la óxido nítrico sintetasa (NOS) que existe en tres isoformas: endotelial (eNOS), inducible (iNOS) y neuronal (nNOS). Fisiológicamente, el ON difunde a través del endotelio a las células de músculo liso vascular donde se une a la guanilato ciclasa y activa la conversión de GMP en GMP cíclico. El incremento de este último se asocia con relajación del músculo liso vascular, vasodilatación mediada por el endotelio, inhibición de la agregación plaquetaria y de la adhesión de los monocitos al endotelio, supresión del crecimiento y migración de las células de músculo liso vascular e inhibición de la oxidación del colesterol asociado a lipoproteínas de baja densidad.

Las investigaciones recientes pusieron de manifiesto la importancia del estrés oxidativo en la degradación del ON. La menor biodisponibilidad de ON vascular contribuye con alteraciones del tono vascular, hipertensión, disfunción del endotelio y aparición y progresión de la aterosclerosis.

El gen de la eNOS se localiza en el cromosoma 7q35-36; se han descrito 10 polimorfismos en este gen, 5 de ellos en intrones. Varios estudios clínicos evaluaron la posible asociación entre estos polimorfismos y la enfermedad cardiovascular: enfermedad coronaria, hipertensión, accidente cerebrovascular y trombosis venosa profunda. Sin embargo, los resultados fueron contradictorios. Uno de los polimorfismos más estudiados es el del intrón 4 de la eNOS, en relación con la aparición de enfermedad coronaria; es posible que el alelo 4a en dicho intrón contribuya con la gravedad de la patología, detectada por angiografía. En el trabajo actual se analiza esta posible asociación. Además, en virtud del papel que tiene la disfunción del endotelio en la aterosclerosis, también se determina la reactividad vascular dependiente e independiente del endotelio como indicador de las consecuencias funcionales del polimorfismo de la eNOS.

Métodos

La muestra de estudio estuvo integrada por 194 sujetos blancos y afroamericanos derivados para angiografía entre 1999 y 2000 al Atlanta Veterans Affairs Medical Center. Se registraron factores de riesgo cardiovascular y tratamientos recibidos. Se estableció la presencia de hipertensión según criterios de la Organización Mundial de la Salud; diabetes e hipercolesterolemia. También se tuvo en cuenta el antecedente familiar de enfermedad coronaria y la historia familiar de patología vascular periférica.

Se tomaron muestras de sangre para estudio de ADN genómico. El fragmento que contiene el intrón 4 se amplificó por reacción en cadena de polimerasa y los productos obtenidos se separaron en gel de electroforesis. Se estableció el estado de portador heterocigota 4a/4b u homocigota 4a/4a. Los participantes fueron sometidos a estudio angiográfico; la detección de arterias principales epicárdicas con al menos 50% de estenosis definió enfermedad coronaria.

La población de estudio se dividió en 3 grupos: sujetos sin patología coronaria angiográficamente detectable o con estenosis inferior al 50%; pacientes con lesión en un único vaso y sujetos con enfermedad de múltiples vasos. Se realizó estudio ultrasonográfico en arteria braquial para establecer la dilatación mediada por el flujo (dependiente del endotelio) e independiente del endotelio, luego de la administración de 0.4 mg de nitroglicerina por vía sublingual.

Resultados

El hábito de fumar y la hipercolesterolemia se relacionaron sustancialmente con la magnitud de la enfermedad coronaria. En cambio, el antecedente familiar de enfermedad coronaria y la historia personal de patología arterial periférica no estuvieron asociados. La prevalencia de diabetes fue mayor en sujetos con alteración de múltiples vasos.

La frecuencia genotípica del polimorfismo en el intrón 4 mostró equilibrio Hardy-Weinberg; la prevalencia del alelo 4a en hombres afroamericanos fue de 0.31 mientras que en los blancos fue de 0.15, diferencia altamente significativa (p < 0.001) aun después del ajuste según la magnitud de la enfermedad coronaria.

La prevalencia del alelo 4a fue mayor en pacientes con afección de múltiples vasos, en ambos grupos étnicos. La distinta frecuencia del alelo 4a en sujetos con enfermedad de múltiples vasos o sin ella persistió en el modelo de variables múltiples después del ajuste según edad, raza, hábito de fumar, hipercolesterolemia, diabetes, hipertensión, historia familiar de enfermedad coronaria y antecedente de vasculopatía periférica.

Debido a que el hábito de fumar es un fuerte factor predictivo de gravedad de enfermedad coronaria se exploró la posible interacción entre este hábito, el polimorfismo del intrón 4 y la gravedad de la enfermedad coronaria. Entre los 43 sujetos no fumadores, la probabilidad de aparición del alelo 4a fue de 0.95 en pacientes con enfermedad de múltiples vasos, respecto de individuos sin este hallazgo. Por lo tanto, señalan los autores, no se observa efecto del alelo 4a en individuos no fumadores. El riesgo en pacientes fumadores fue de 2, cifra mayor pero sin diferencia estadística.

Las modificaciones en la vasodilatación mediada por el flujo fueron ligeramente mayores en sujetos con el genotipo 4a/4b en comparación con los portadores homocigotas 4b/4b pero la diferencia no alcanzó valor estadístico. Los cambios en la dilatación independiente del endotelio siguieron una pauta semejante, incluso después del control según raza y gravedad de la enfermedad coronaria.

Discusión

La investigación clínica y experimental estableció una conexión entre la alteración funcional de la eNOS y la presencia de enfermedad cardiovascular. En este artículo, los autores analizan la posible correlación entre el polimorfismo del intrón 4 del gen de eNOS, la gravedad de la enfermedad coronaria y la función del endotelio. Los resultados sugieren que predominantemente en varones de edad avanzada derivados para estudio angiográfico hay una asociación significativa entre dicho polimorfismo y estenosis coronaria en múltiples vasos. La asociación es más fuerte en sujetos afroamericanos respecto de la raza blanca. Entre los primeros, la probabilidad de ser portador del alelo 4a en presencia de alteración de múltiples vasos -en comparación con individuos sin estas lesiones- es de 2.45, mientras que el valor correspondiente en la cohorte de raza blanca es de 1.58. Al contrario, los hallazgos en términos de funcionalidad del endotelio no sugieren que el polimorfismo afecte considerablemente dicha función.

En conclusión, añaden los autores, las observaciones del estudio actual indican una posible conexión entre la presencia del alelo 4a en el gen de eNOS y la gravedad de la enfermedad coronaria pero no así con la presencia de alteración funcional del endotelio. Más aun, la relación encontrada es más fuerte en sujetos afroamericanos. Aunque los hallazgos de esta investigación no sugieren una relación entre el polimorfismo y la función del endotelio -y dada la importancia de este parámetro en la aparición y progresión de la enfermedad aterosclerótica- se justifican estudios más amplios con la finalidad de establecer con precisión los efectos de las variantes genéticas de la eNOS sobre la función endotelial y su interacción con otros factores de riesgo cardiovascular. Estos resultados permitirán diseñar nuevas terapias destinadas a restaurar la producción endotelial de ON, en virtud de los genotipos particulares de eNOS.